实时荧光定量PCR扩增曲线包括基线期,,指数扩增期,,线性扩增期和扩增平台期,,标准的曲线应该呈典范的S型。。不规则曲线可以凭证曲线的详细情形来剖析:1)曲线呈斜线上升原因:热盖失灵或热盖没盖紧,,导致控温禁绝、液体挥发。。解决步伐:替换仪器热盖或将热盖盖紧。。图1 曲线呈斜线上升2)扩增曲线分成两段(断裂)图2扩增曲线分成两段(断裂)原因:基线的终点大于Ct值,,通常是由于模板DNA浓度偏高,,CT值< 15,,而基线仍然取3-15,,其中包括部分扩增信号,,导致曲线被压下去。。解决要领:减小基线终点,,至Ct值前4个循环,,重新剖析数据。。3)直线扩增曲线图3 某些样本泛起直线扩增曲线原因:探针部分降解解决步伐:建议替换试剂举行测试。。4)曲线平台期下掉原因:盖子没盖紧解决步伐:PCR反映管盖子盖上后,,检查盖子是否盖紧。。图4 曲线平台期下掉